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RNA-Virome (RNA shotgun sequencing) from lake Limnopolar on Livingston Island (Antarctica)

Última versión Publicado por SCAR - Microbial Antarctic Resource System en 26 de marzo de 2019 SCAR - Microbial Antarctic Resource System
Fecha de publicación:
26 de marzo de 2019
Licencia:
CC-BY 4.0

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Descripción

RNA shotgun sequencing (454 pyrosequencing) metagenome dataset of viruses in lake Limnopolar (Livingston Island, Antarctica), over a three-year period.

Versiones

La siguiente tabla muestra sólo las versiones publicadas del recurso que son de acceso público.

¿Cómo referenciar?

Los usuarios deben citar este trabajo de la siguiente manera:

Lopez-Bueno A, Rastrojo A, Peiro R, Arenas M, Alcami A (2019): RNA-Virome (RNA shotgun sequencing) from lake Limnopolar on Livingston Island (Antarctica). v1.0. SCAR - Microbial Antarctic Resource System. Dataset/Metadata. https://ipt.biodiversity.aq/resource?r=virome_livingston_island_antarctica&v=1.0

Derechos

Los usuarios deben respetar los siguientes derechos de uso:

El publicador y propietario de los derechos de este trabajo es SCAR - Microbial Antarctic Resource System. Este trabajo está autorizado bajo una Licencia Creative Commons Atribución/Reconocimiento 4.0 Internacional (CC-BY) 4.0.

Registro GBIF

Este recurso ha sido registrado en GBIF con el siguiente UUID: 9b846f85-327e-412d-abb7-2eef49b6fae4.  SCAR - Microbial Antarctic Resource System publica este recurso y está registrado en GBIF como un publicador de datos avalado por Scientific Committee on Antarctic Research.

Palabras clave

Metadata

Contactos

¿Quién creó el recurso?:
-

A. Lopez-Bueno
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES
A. Rastrojo
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES
R. Peiro
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES
M. Arenas
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES
A. Alcami
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES

¿Quién puede resolver dudas acerca del recurso?:

A. Alcami
Universidad Autónoma de Madrid
Madrid
ES

¿Quién documentó los metadatos?:
-

Maxime Sweetlove
Research assistent
Royal Belgian Institute of Natural Sciences
Rue Vautier 29
1000 Brussels
BE

¿Quién más está asociado con el recurso?:

Usuario

Cobertura geográfica

Limnopolar lake, Livingston Island, South Shetland Islands, Antarctica

Coordenadas límite Latitud Mínima Longitud Mínima [-62,38, -61,06], Latitud Máxima Longitud Máxima [-62,38, -61,06]

Cobertura taxonómica

RNA-Viruses targeted with RNA-shotgun sequencing (454 pyrosequencing)

Cobertura temporal

Fecha Inicial / Fecha Final 2007-11-27 / 2010-02-01

Datos del proyecto

No hay descripción disponible

Título RNA-Virome (RNA shotgun sequencing) from lake Limnopolar on Livingston Island (Antarctica)
Fuentes de Financiación This project was funded by the Spanish Polar Programme and the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness (CTM2008‐05134‐E/ANT and CTM2009‐08644‐E).

Personas asociadas al proyecto:

A. Alcami

Métodos de muestreo

Samples were taken aseptically.

Área de Estudio Lake Limnopolar (Livingston Island, Antarctica) was sampled for cyanobacteria mats on the 27th of November 2006, the 22nd of January 2007 and the 1st of February 2010.

Descripción de la metodología paso a paso:

  1. Cyanobacterial mat samples (2.5 g) were homogenized in SM buffer (50 mm Tris‐HCl pH 7.5, 100 mm NaCl and 8 mm MgSO4.7H2O) by three cycles of vigorous vortex and sonication in a water bath during 20 and 10 s, respectively, then centrifuged at 3000 g for 5 min. This process was repeated twice. The resulting supernatants were combined and centrifuged at 8000 g for 1 h and then filtered through a 0.45‐μm syringe filter (Millex, Durapore PVDF) to remove cellular organisms. The resulting viral fractions, as well as those from lake water samples, were purified as described previously (López‐Bueno et al. 2009). In the case of the water sample collected in 2010, 0.45 μm filtration was carried out by TFF using two 0.093 m2 polyethersulfone filter cassettes (Pall) and nuclease treatment of purified viral particles included 100 U/mL of nuclease S7 (Roche). RNA viral genomes were purified with Trizol‐LS (Invitrogen) followed by DNAseI RNAse‐free (Roche) treatment before randomly amplification by sequence independent single primer amplification (SISPA) (Victoria et al. 2008; Djikeng et al. 2009; Culley et al. 2010). Briefly, Superscript II or III and the Klenow fragment (3′–>5′exo‐) enzyme (NEBiolabs) were used to convert RNA into dsDNA using 60 pmol of pseudo‐degenerated primers FR26‐RV (5′‐GCCGGAGCTCTGCAGATATCNNNNNN‐3) for the water sample collected in 2007 and primer A (5′‐GTTTCCCAGTCACGATANNNNNNNNN‐3) for samples collected in 2006 and 2010. After 40 cycles of PCR amplification with FastStart high fidelity polymerase (Roche), DNA fragments between 500 and 3000 bp were gel‐extracted with QIAquick Gel Extraction kit (Qiagen) and sequenced in the 454 GS FLX titanium platforms (Roche‐454) from LifeSequencing (Valencia, Spain) or from Parque Científico de Madrid (Spain).

Referencias bibliográficas

  1. López‐Bueno, A., Rastrojo, A., Peiró, R., Arenas, M., & Alcamí, A. (2015). Ecological connectivity shapes quasispecies structure of RNA viruses in an Antarctic lake. Molecular ecology, 24(19), 4812-4825. https://doi.org/10.1111/mec.13321

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